色谱 ›› 2020, Vol. 38 ›› Issue (3): 278-286.DOI: 10.3724/SP.J.1123.2019.09015
收稿日期:
2019-09-12
出版日期:
2020-03-08
发布日期:
2020-12-10
通讯作者:
张丽华
作者简介:
张丽华, Tel:(0411)84379720, E-mail:lihuazhang@dicp.ac.cn基金资助:
HU Yechen1,2, JIANG Bo1, ZHANG Lihua1,*(), ZHANG Yukui1
Received:
2019-09-12
Online:
2020-03-08
Published:
2020-12-10
Contact:
ZHANG Lihua
Supported by:
摘要:
蛋白质磷酸化修饰在细胞的信号转导、代谢、发育等生命过程中发挥着重要作用。除了研究较为透彻的发生在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸侧链羟基的O-磷酸化修饰之外,近年来,发生在组氨酸、精氨酸和赖氨酸侧链氨基的N-磷酸化修饰受到了越来越广泛的关注。然而,由于N-磷酸化修饰具有独特的P-N键结构,导致其化学稳定性差。尤其是在O-磷酸化肽段富集常用的酸性条件下,N-磷酸化极易丢失。因此,目前对N-磷酸化蛋白质的研究仍处于初始阶段。该文针对蛋白质N-磷酸化修饰的特点、富集和鉴定方法进行了综述,并对其发展前景进行了展望。
胡晔晨, 江波, 张丽华, 张玉奎. N-磷酸化修饰蛋白质的富集和鉴定方法[J]. 色谱, 2020, 38(3): 278-286.
HU Yechen, JIANG Bo, ZHANG Lihua, ZHANG Yukui. Advancesin enrichment and detection methods for N-phosphorylated proteins[J]. Chinese Journal of Chromatography, 2020, 38(3): 278-286.
图2 (a) pHis的类似物与(b)3种合成肽文库的结构, 其中His或稳定的pHis类似物(6或7)被随机地插入中性氨基酸(丙氨酸和甘氨酸)中
Fig. 2 (a)Analogues of pHis and (b) structures of the three synthetic peptide libraries used in which either His or a stable pHis mimetic (6 or 7) is flanked by randomized, neutral amino acids (alanine and glycine)
图5 (a) ReDD策略的流程图和(b)pLys肽段发生的化学过程[52]
Fig. 5 (a) Flowchart of retention time difference combining dimethyl labeling (ReDD) strategy and (b) chemical process of pLys peptide[52] FA: formic acid; SCX: strong cation exchange chromatography.
图6 (a) CHD策略的流程图和(b)pLys肽段发生的化学过程[53]
Fig. 6 (a) Flowchart of cleavable hydrophobic derivatization (CHD) strategy and (b) chemical process of pLys peptide[53] Dec-disulf-NHS: 2, 5-dioxopyrrolidin-1-yl-3-(decyldisulfanyl)propanoate; TCEP: tris(2-carboxyethyl)phosphine.
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