色谱

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第36卷第10期目次

2018, 36 (10): 0-0.

摘要 ( 182 )

PDF(5592KB) ( 34 )

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复合靶指数富集的配基系统进化技术研究进展

武振宁, 薛书江, 杨咏洁

2018, 36 (10): 947-951. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05019

摘要 ( 332 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(832KB) ( 114 )

核酸适配体是一类具有高度特异性和亲和力的单链寡核苷酸，被誉为"人工单抗"，具有广阔的应用前景。它一般是通过指数富集的配基系统进化（SELEX）技术筛选获得。目前SELEX技术多局限于单一、纯化的可溶性蛋白质靶标。然而，蛋白质的纯化过程繁琐，耗时费力，而且很多靶标（如血清中的低丰度蛋白质或细胞的膜蛋白）很难纯化获得单一纯品。复合靶SELEX技术则可以避免靶标的纯化过程，能够保持靶标的天然构象，并且可以在未明确靶标的组成及结构特性的前提下，通过高通量的盲筛获得一系列特异性核酸适配体。该文主要介绍以未纯化的各种生物样本为复合靶的SELEX技术，以期为核酸适配体的筛选提供新思路。

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药物中磺酸酯类基因毒性杂质研究进展

刘雪薇, 厉程, 韩海云, 张文鹏, 陈东英

2018, 36 (10): 952-961. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05004

摘要 ( 744 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(995KB) ( 421 )

该文概述了近10年来有关药物中基因毒性杂质监管指南的完善历程与相关检测方法的研究进展。介绍了基因毒性杂质从早期的完全避免到目前的阶段化毒理学关注阈值（TTC）的风险控制理念以及各主流监管机构的具体要求。作为一类重要的基因毒性杂质，磺酸酯主要来源于磺酸及衍生物与低级醇（如甲醇、乙醇、异丙醇等）之间发生的副反应，具有化学结构类型多样化的特点。该文较为详尽地介绍了磺酸酯的形成机理和文献所采用的液相色谱法和气相色谱法，并对色谱方法的选择、预处理方式、衍生化方法及相应痕量水平的灵敏度和回收率等进行了评述。由此期望为合理控制药物中磺酸酯类基因毒性杂质，为保证药物的质量安全性提供有益的指导意见。

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顶空气相色谱-质谱联用技术的应用进展

张茜, 刘炜伦, 路亚楠, 吕运开

2018, 36 (10): 962-971. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05013

摘要 ( 1067 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(948KB) ( 730 )

顶空分析作为一种无有机溶剂萃取的样品处理技术，通常与气相色谱-质谱（GC-MS）技术结合用来分析复杂基质中的挥发性有机物。顶空气相色谱-质谱（HS-GC-MS）技术具有快速、高效、环保、灵敏度高等特点，在常规分析中发挥着重要作用。该文简要概述了静态顶空、动态顶空、顶空固相微萃取分析以及GC-MS联用技术，并介绍了整个顶空分析系统的影响因素和优化过程。根据基质类型的分类，综述了HS-GC-MS在食品和饮料、环境、生物等样品中的应用实例。HS-GC-MS的研究非常活跃，不断出现新应用，在分析挥发性有机物方面具有广阔前景。

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大孔硅胶的制备及其在多糖衍生物手性固定相上的应用

吴海波, 薛兴亚, 李奎永, 周永正

2018, 36 (10): 972-978. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05007

摘要 ( 352 ) [Full Text(HTML)] ()

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为制备孔径为100 nm的大孔硅胶，考察了热液法和焙烧法对球形硅胶（粒径5 μm，孔径10 nm）的扩孔效果。采用热液法扩孔时，在水溶液中加入22 g/L氟化钠，可以有效增强扩孔效果，在高压釜内160℃加热48 h便可扩孔至100 nm，但孔径不均匀。采用焙烧法扩孔时，通过调节焙烧温度、时间以及复盐LiCl-NaCl的加入量可以方便地控制扩孔速度与效果；在每10 g硅胶中加入1.125 g LiCl·H₂O和0.75 g NaCl，于500℃焙烧3~5 h，可得到100 nm大孔硅胶；该方法简单、高效，扩孔后的硅胶孔径分布均匀，表面形态与商品化的Fuji-1000硅胶相似。将两种扩孔方式得到的硅胶经氨基修饰后，涂覆纤维素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）制得了相应的手性固定相。结果表明，采用焙烧法扩孔得到的硅胶制备的固定相明显具有较好的分离选择性及分离度。

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稳定同位素稀释离子色谱-三重四极杆质谱法测定血浆和尿液中的氟乙酸

张晓艺, 张秀尧, 蔡欣欣, 李瑞芬

2018, 36 (10): 979-984. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.06011

摘要 ( 299 ) [Full Text(HTML)] ()

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建立了离子色谱-三重四极杆质谱测定血浆和尿液样品中氟乙酸（MFA）的方法。血浆样品经高氯酸超声提取，尿液样品经高氯酸酸化，血浆和尿液提取液在pH 0.5~1.0条件下用叔丁基甲醚（MTBE）萃取，萃取液经氮吹浓缩后溶于0.1%（v/v）氨水溶液。以Ionpac AS 19型阴离子色谱柱为分析柱，在线自动产生的氢氧化钾作为淋洗液进行梯度分离，柱流出液经阴离子抑制器抑制后进入质谱系统。采用电喷雾电离源，在负离子、多离子监测（MRM）模式下检测，¹³C₂-氟乙酸稳定同位素内标法定量。血浆和尿液样品中氟乙酸的平均加标回收率为96.2%~120%，相对标准偏差为1.1%~13.1%（n=6），方法的检出限（S/N=3）分别为0.03 μg/L和0.1 μg/L。该法简单、灵敏、准确，可用于生物样品中氟乙酸的检测。

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高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定血清中胆固醇及其6种代谢标志物

黄雯雯, 勾新磊, 胡铁靖, 胡光辉, 赵新颖

2018, 36 (10): 985-990. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05029

摘要 ( 387 ) [Full Text(HTML)] ()

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利用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（HPLC-Q/Orbitrap HRMS）测定血清中的胆固醇及其6种代谢标志物（2，4-脱氢胆甾醇、7-烯胆甾醇、菜油固醇、豆固醇、β-谷固醇和角鲨烯）。以乙腈作为提取溶剂，超声提取，采用Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），以95%（v/v）的甲醇-乙腈（2：8，v/v）-5%（v/v）水做流动相，等度洗脱15 min，流速0.4 mL/min。在大气压化学电离源（APCI）正离子扫描模式下，质谱采用全扫描/数据依赖二级扫描（Full MS/dd MS²）监测模式，同时获得定性和定量结果，一级分辨率为70000 FWHM，二级分辨率为17500 FWHM。7种目标物质在其线性范围内的线性相关系数（r²）均不小于0.992，检出限为0.8~62.1 μg/L，3个加标水平下的回收率为82.1%~97.5%，相对标准偏差（RSD）为1.6%~7.4%。方法准确、简单、快捷，可以作为血清中胆固醇及其6种代谢标志物的检测方法。

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整体柱固相萃取-液相色谱-串联质谱法在线分析大米中15种酰胺类除草剂残留量

张海超, 艾连峰, 马育松, 王敬, 李晓菲

2018, 36 (10): 991-998. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05018

摘要 ( 318 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1067KB) ( 117 )

以疏水的聚（甲基丙烯酸丁酯-乙二醇二甲基丙烯酸酯）整体柱作为固相萃取柱，建立了大米中15种酰胺类除草剂残留的在线固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱测定的方法。本方法采用乙腈提取目标化合物，经在线整体柱净化，Hypersil GOLD色谱柱分离，流动相采用0.5%（v/v）甲酸水溶液-乙腈进行梯度洗脱，在电喷雾正离子模式下以多反应监测（MRM）方式测定。15种除草剂的线性关系良好，相关系数（r）大于0.998。方法检出限和定量限为0.20~2.0 μg/kg和0.50~5.0 μg/kg。待测物在2.0、5.0、10.0、50.0 μg/kg（敌稗为5.0、10.0、50.0、100 μg/kg）4个浓度水平下加标回收率为75.5%~121.3%，相对标准偏差为2.89%~12.38%。该方法快速简便，灵敏度高，可用于大米中酰胺类除草剂的快速定性定量分析。

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QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法检测羊肉中8种抗真菌药

张凯, 秦宇, 卞华, 曹慧, 刘天益, 葛宇

2018, 36 (10): 999-1004. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05028

摘要 ( 329 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1638KB) ( 89 )

建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测羊肉中8种抗真菌药的方法。羊肉样品用含2.0%（体积分数）甲酸的乙腈溶液提取后，采用QuEChERS方法净化。采用Atiantis^® T3色谱柱（100 mm×2.1 mm，3 μm）进行分离，以乙腈-0.1%（v/v）甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，在电喷雾电离源、正离子模式（ESI⁺）和多反应监测模式（MRM）下进行定性定量分析。实验比较了不同提取溶剂的提取效果，并优化了色谱和质谱的分析条件。结果表明，8种抗真菌药物在0.2~50 μg/L范围内线性关系良好，相关系数（R²）均>0.99；检出限（LOD）为0.3~3.0 μg/kg，定量限（LOQ）为1.0~10.0 μg/kg。8种抗真菌药在低、中、高3个水平下的平均加标回收率为70.3%~118.4%，相对标准偏差（RSD）为0.4%~4.3%（n=6）。该方法灵敏高效，回收率优良，重复性好，适用于羊肉样品抗真菌药物的有效检测。

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超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法定性筛查保健食品中西地那非及其相关功效类非法添加化合物

于泓, 胡青, 孙健, 冯睿, 张甦, 张静娴, 毛秀红, 季申

2018, 36 (10): 1005-1017. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.04031

摘要 ( 300 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(10270KB) ( 95 )

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）定性筛查102种西地那非及其相关功效化合物的方法。甲醇超声提取样品；采用Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱（75 mm×3.0 mm，2.7 μm），以0.1%（v/v）甲酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱，流速0.4 mL/min；采用电喷雾离子（ESI）源，Q-TOF-MS作检测器，正离子模式检测；与对照品保留时间、母离子及碎片离子精确相对分子质量、元素组成比对，准确定性。西地那非等100种化合物在10种基质中的检出限为0.1~50 mg/kg或0.1~50 mg/L。并分类归纳了文中涉及的98种磷酸二酯酶5抑制剂质谱碎片裂解规律，为可疑物的识别和鉴定提供参考。该方法已应用于实际样品的测定，检出19种化合物，有效打击了非法添加行为。

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在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定地表水中超痕量阿特拉津

沈斐, 许燕娟, 宋挺, 陈静, 王晔

2018, 36 (10): 1018-1021. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.06031

摘要 ( 275 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(834KB) ( 81 )

建立了在线固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱（on line SPE-UPLC-MS/MS）测定地表水中超痕量阿特拉津的方法。样品经滤膜过滤，HLB Direct Connect HP在线固相萃取小柱富集纯化，甲醇溶液洗脱，以Acquity BEH 130为分析柱，串联质谱进行检测，外标法定量。阿特拉津在1.0~5000 ng/L范围内线性关系良好，相关系数（r）为0.9989；该方法检出限为0.2 ng/L，阿特拉津的回收率为83.0%~105.1%，相对标准偏差为1.6%~5.3%（n=7），满足超痕量分析测试的要求。该法灵敏度高，分析速度快，对于保障水环境安全、及时提供污染信息、有效应对环境应急突发事件具有十分重要的意义。

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固相萃取-气相色谱-负化学离子源质谱法测定运动场所合成材料面层和稀释剂中的短链氯化石蜡

黄绍军, 杜萍, 刘春侠, 杨俊, 杨朝芬, 孙卉, 黄秋玲

2018, 36 (10): 1022-1027. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05002

摘要 ( 294 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1743KB) ( 116 )

建立了用于运动场所合成材料面层和稀释剂中短链氯化石蜡（SCCPs）总含量测定的固相萃取-气相色谱-负化学离子源质谱法（SPE-GC-NCI-MS）。对气相色谱和质谱的分析条件进行了优化；试样经超声提取、弗罗里硅土固相萃取小柱净化后，选择性离子监测模式（SIM）扫描，外标法定量。方法在0.0501~100.17 mg/L的宽广范围内有良好的线性关系，线性相关系数R²为0.9995，方法检出限低至0.50 μg/g（即0.000050%），平均回收率为83.2%~96.3%，相对标准偏差为1.56%~6.02%。对10批次实际样品进行检测，含量在0.016%~0.55%范围内，检测结果满足欧盟对此类物质的限量要求。方法可用于运动场所合成材料面层和稀释剂中短链氯化石蜡的实际检测。

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分散固相萃取-气相色谱-质谱法测定茶叶中18种多氯联苯

刘腾飞, 杨代凤, 章雪明, 毛健, 董明辉

2018, 36 (10): 1028-1037. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.07014

摘要 ( 320 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(9678KB) ( 91 )

建立了以羧基化多壁碳纳米管（MWCNTs-COOH）和N-丙基乙二胺（PSA）为分散固相萃取吸附剂的前处理净化技术，结合气相色谱-质谱（GC-MS）同时检测茶叶中18种多氯联苯（PCBs）的方法。茶叶样品经正己烷-丙酮（1：1，v/v）超声提取后，通过甲苯溶剂置换，以MWCNTs-COOH和PSA混合吸附剂净化，采用电子轰击离子源、选择离子监测模式测定，以保留时间和特征离子丰度比定性，基质匹配标准溶液外标法定量。考察了提取溶剂及吸附剂种类和用量、提取时间和净化时间对分析结果的影响，优化了气相色谱-质谱条件，并评估了优化实验条件下的方法性能。在最优实验条件下，18种PCBs在5~500 μg/kg范围内线性关系良好，相关系数（r）不低于0.9998；当加标水平为5、10和100 μg/kg时，3种茶叶基质中18种PCBs的平均回收率为90.7%~115.2%，相对标准偏差（n=5）为0.3%~10.9%；方法的检出限为0.3~1.7 μg/kg，定量限均为5 μg/kg。该方法操作简单、快速，准确可靠、灵敏度高，样品净化效果好，可用于不同种类茶叶基质中18种PCBs的测定。

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快速溶剂萃取-气相色谱-串联质谱法同时测定土壤中有机氯及有机磷农药

宋晓娟, 贺心然, 尹明明, 万延延

2018, 36 (10): 1038-1044. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05012

摘要 ( 384 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1673KB) ( 116 )

建立了快速溶剂萃取（ASE）-气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）同时分析土壤中8种有机氯农药（OCPs）和5种有机磷农药（OPPs）的方法。样品由正己烷-丙酮（1：1，v/v）溶液萃取，经无水硫酸钠脱水、氮吹仪浓缩后，采用硅胶（Si）固相萃取小柱进行净化，正己烷-丙酮（1：1，v/v）溶液进行洗脱，然后经HP-5MS色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）分离，在电子轰击电离源下以多反应监测（MRM）模式进行检测，内标法定量。分析结果表明，13种目标物在1.00~100 μg/L范围内线性关系良好，相关系数（R）大于0.995；加标回收率为66.8%~88.4%，能够实现准确定量；日内精密度与日间精密度均小于10%。当取样量为10.0 g时，8种OCPs的方法检出限为0.02~0.04 μg/kg，5种OPPs的方法检出限为0.06~0.12 μg/kg，能够满足土壤农药残留的检测要求。

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径向展开薄层色谱法分离生物碱及其分离效能

张梦婷, 巩丹丹, 孙万阳, 孙国祥

2018, 36 (10): 1045-1052. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05016

摘要 ( 412 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1457KB) ( 182 )

径向展开薄层色谱法是一种将样品由中心沿径向向外展开的简便、快速、高效的色谱方法。该文组装了简单的径向展开薄层色谱装置，并建立了朱砂安神丸的径向展开薄层色谱检测法，对其中的生物碱成分进行分离，研究了径向展开薄层色谱的分离特性。从薄层色谱基础理论出发，对径向展开薄层色谱和一般薄层色谱的分离效能进行了比对研究，设计试验进行计算和求解。证明了径向展开薄层色谱法更快、更高效、更经济，适用于生物碱等高极性样品分离。探索了径向展开薄层色谱法高分离效率的理论根源，这一研究思路也为理论创新提供了新的方法和思路。

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基于表面静电排斥/反相混合模式色谱的黄连生物碱分析方法

张华蓉, 郭志谋, 于伟, 闫竞宇, 金高娃, 王联芝

2018, 36 (10): 1053-1060. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.06006

摘要 ( 350 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1138KB) ( 141 )

建立了基于表面静电排斥/反相混合模式色谱的黄连生物碱分析方法。选用实验室自制的C18HCE柱，以乙腈和水为流动相，考察了甲酸、乙酸两种流动相添加剂及其在流动相中的体积分数对黄连生物碱的保留、峰形及选择性的影响。最终确定0.1%（v/v）乙酸作为添加剂能实现黄连生物碱的良好分离，结合质谱和文献对其主要色谱峰进行了识别，分别为黄连碱、表小檗碱、非洲防己碱、药根碱、小檗碱、巴马汀。参考2015版《中国药典》对黄连生物碱的含量测定方法，以盐酸小檗碱进行方法学考察，结果表明，在0.5~100 mg/L范围内线性关系良好，相关系数为0.9996，平均加标回收率为93.74%。利用所建立的方法测定了湖北和重庆两个产地不同批次的黄连样品中各生物碱的含量。该方法简便，重复性好，精密度高，可为其他碱性化合物的分离分析提供参考。

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制备液相色谱法分离纯化碘帕醇

李华军, 陈茜

2018, 36 (10): 1061-1066. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.06001

摘要 ( 394 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1264KB) ( 137 )

基于制备液相色谱法，开发与优化了碘帕醇的分离纯化工艺，制备得到高纯度碘帕醇样品。实验首先在分析水平发展碘帕醇的反相分离方法，考察了两种不同键合量的反相C18固定相、柱温和上样量对碘帕醇的保留、分离度和峰形等的影响。结果表明，碘帕醇在键合量为13.7%的反相C18-1分析柱（250 mm×4.6 mm，10 μm）上保留较好，且可与杂质有效分离；柱温升高，碘帕醇保留变弱，和杂质之间的分离度降低，最终选用20~25℃作为分离纯化的温度；上样量增加，碘帕醇出峰时间提前，不利于前杂的去除。在制备水平上，以水和甲醇为洗脱剂，在20℃条件下使用装填C18-1固定相的制备柱（270 mm×50 mm，10 μm）对碘帕醇进行分离纯化，制备的碘帕醇样品的色谱纯度可达98.97%，回收率为93.44%，各项有关物质均符合限量规定。该方法可以在保证高回收率的条件下有效降低杂质水平，为碘帕醇分离纯化生产工艺的开发提供新方法。

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基于可变亲水性溶剂的液液微萃取-气相色谱-质谱法分析尿中的2'-氯地西泮

徐仿敏, 李海波, 魏万里, 刘凌云, 李强

2018, 36 (10): 1067-1072. DOI: 10.3724/SP.J.1123.2018.05022

摘要 ( 296 ) [Full Text(HTML)] ()

PDF(1126KB) ( 93 )

建立一种基于可变亲水性溶剂的液液微萃取-气相色谱-质谱联用法，快速检测尿液中2'-氯地西泮。对影响萃取效率的可变亲水性溶剂的种类、用量、转换条件、萃取时间等因素进行考察和优化。在最佳实验条件下，尿液中2'-氯地西泮的线性范围为0.025~2.5 mg/L，检出限为0.007 mg/L，日内和日间回收率为76.5%~90.3%，日内和日间精密度为3.3%~6.5%。该方法具有良好的线性、检出限、回收率和精密度，有较好的应用价值，可应用于尿液中2'-氯地西泮的分析。

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